一、開機操作規程
1. 開機
按Power鍵,按以下順序依次開啟HPLC系統各設備的電源:總電源→泵→柱溫箱
2. 脫氣
將吸濾頭分別放入流動相中,旋轉排液閥至180度,啟動鍵板上的Purge鍵,排液1~2min;再按一次Purge鍵停止沖洗操作,關緊排液閥。
3. 設定參數
按Func鍵依次設定儀器參數:流速(或壓力)、壓力最大限、壓力最小限。當屏幕顯示區閃爍時,提示可以輸入數值,按Enter鍵確認。在A泵面板上,按Conc鍵,根據流動相比例,設置B泵比例。
4. 啟動流速
先按CE鍵顯示初始屏幕,然后按一下Func鍵,屏幕顯示區閃爍,提示可以輸入數值,按Enter鍵確認。以0.2ml/min的梯度逐步升至所需流速(一般為1.0ml/min)。按Enter鍵之前,按CE鍵可以刪除新設定的數值。
5. 準備進樣
平衡10min后,開啟檢測器、計算機以及信號收集器。待基線平衡后(約15~30min),進樣,即可進行等度洗脫。
6. 梯度洗脫
先按照上述方法,設定好0時刻流動相比例,然后按edit鍵編輯梯度程序,然后按Enter鍵,按照規定流程進行設定。
6.1 如有要刪除的程序步驟,就按Enter鍵查找需要刪除的程序,然后按del鍵即可。
6.2切記:最后設定好程序,按CE鍵返回原始狀態,升至需要流速,等基線平衡后(約15~30min),進樣,立即按run鍵,啟動梯度程序。
7. 清洗
首先關閉檢測器,然后按照參數方法,降低流速,換用流動相,具體內容見注意事項。
8. 關閉HPLC系統各設備所有電源,且傾倒廢液。
二、注意事項
1. 特別注意:一定打開排液閥,再按Purge鍵,否則很容易把色譜柱沖塌陷。
2. 如果流動相中含有酸,用10%的甲醇(乙腈)水溶液沖洗系統40~60min,然后再用100%甲醇沖洗系統10min,保證所有管路都在100%甲醇溶液中。
3. 如果流動相中含有離子對或緩沖鹽,用10%的甲醇(乙腈)水溶液沖洗系統60~90min,然后再用100%甲醇沖洗系統10min,保證所有管路都在100%甲醇溶液中。
4. 如果管路長時間不用,請用100%甲醇把管路沖洗干凈,以免管路發霉、長菌、腐敗。
5. 經常將2個管路相互使用不同的流動相。
6. 特別注意:在做樣品制備時,一定記住要將檢測器中,入口的阻尼管更換為 二通。
7.如果儀器可以連續使用,不必關機,如果超過4h以上,就可以考慮關機,節約氘燈壽命。
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